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Métodos Bacteriológicos

1. Salmonella

Los alimentos existen diferentes protocolos para el aislamiento de Salmonella, todos ellos son esencialmente similares en principio y emplean las etapas de preenriquecimiento, enriquecimiento selectivo, aislamiento en medios de cultivo selectivos y diferenciales, identificación bioquímica y confirmación serológica de los microorganismos

Medios de pre-enriquecimiento

  •  Agua de peptona tamponada
  •  Caldo lactosado

Caldo de enriquecimiento

  • Caldo selenito-cistina
  • Caldo tetrationato
  • Vassiliadis-Rappaport
  • Caldo de soya tripticasa
  • Leche descremada reconstituida
  • Caldo soya tripticasa estéril adicionado con sulfito de potasio

Medios de aislamiento

  •  Agar verde brillante (VB)
  •  Agar con sulfito de bismuto
  •  Agar xilosa lisina desoxicolato (XLD)
  •  Agar para Salmonella y Shigella (SS)
  •  Agar entérico Hektoen

Medios para pruebas bioquímicas

  • Agar de tres azúcares y hierro (TSI)
  • Agar de hierro y lisina (LIA)
  • Agar nutritivo
  • Medio de SIM (para Sulfuro, Indol y Movilidad)
  • Agar citrato de Simmons
  • Caldo MR-VP (Rojo de metilo-Voges Proskauer)
  • Caldo manitol
  • Caldo malonato
  • Caldo urea
  • Caldo de urea rápido
  • Caldo infusión cerebro corazón

Cantidad de muestras

Se recomienda una muestra de 25 g o más, siempre con una proporción de 1:9 de muestra/caldo

2.Staphylococcus

El Staphylococcus aureus es un microorganismo que puede estar presente en alimentos y producir una
poderosa enterotoxina que al ingerirse causa intoxicaciones alimentarias

Se determina Staphylococcus aureus en alimentos para:

  • Confirmar la presencia de este microorganismo como agente causal de una enfermedad de origen alimentario
  • Determinar si un alimento o ingrediente es fuente potencial de este microorganismo enterotoxigénico
  • Demostrar la contaminación post proceso por contacto humano o con superficies inadecuadamente sanitizadas

Soluciones diluyentes

  •  Solución reguladora de fosfatos (solución concentrada)
  •  Agua peptonada

Medios de cultivo

  • Medio de Baird-Parker
  • Caldo de infusión cerebro-corazón (BHI)
  • Acido desoxirribonucleico helicoidal de timo de ternera

Reactivo biológico

  • Plasma de conejo

Procedimiento

  1. Diluir muestras
  2. Seleccionar las placas que tengan entre 15 y 150 colonias típicas de Staphylococcus aureus
  3. Realizar prueba de coagulasa
  4. Realizar prueba de termonucleasa

Cantidad de muestras

  • Muestras líquidas: tomar 1 ml de la muestra y diluir con 9 ml del diluyente
  • Muestras sólidas: pesar una cantidad de 10 u 11 g de la muestra por analizar en un recipiente o bolsaplástica estériles de tamaño adecuado   
 

Según la NOM-110-SSA1-1994. Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico.

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